關於NEPA21的(de)常見問題解答

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Questions Answers
Q1 NEPA21可以用於細菌或酵母的電轉化嗎? A1 不(bú)行,NEPA21是專用於動物細胞或植物原(yuán)生質體轉染的,基於方波波形(xíng)而設計,電壓控製精確且電刺激溫和(hé),有利於提高轉染效率和細胞存活率(lǜ)。轉化細菌和酵母適宜使用基於指數衰減波波形的電穿孔儀,或其(qí)它能產生高壓脈(mò)衝的裝置。
Q2 什麽是電穿孔脈衝(poring pulse)? A2 電穿孔脈衝是用於使細胞膜或核膜上產生小孔的脈衝電(diàn)刺(cì)激,DNA或RNA等外源基因(yīn)可以通(tōng)過小孔進(jìn)入到細胞內。這(zhè)是用電穿孔法進行基因導(dǎo)入的基本原理,大部分品牌的電轉染儀都設計有這個步驟。NEPA21除可(kě)以產生電穿孔脈衝外,還(hái)具備(bèi)很多新(xīn)功能,請參看Q3, Q4 和Q5
Q3 什麽是導入脈(mò)衝(transfer pulse)? A3 導入脈衝用於將帶負電的核酸分子通過"電泳效應"導入到細胞(bāo)中,采用低壓和長脈衝時間的設計,充分利用"小孔修複"的這段時間,大大增加基因的轉染效率。這是NEPA GENE的專利(lì)技術。
Q4 為什麽要進行基(jī)因的反向導入? A4 在體(tǐ)外轉(zhuǎn)染(in vitro)尤其是懸浮狀態下轉染時,雙向的基因導入模式,可以大大(dà)提高(gāo)轉染效率;在活體(in vivo)轉染時,雙向導入模式,可以擴大轉染(rǎn)區(qū)域。這是NEPA GENE的專利技術。
Q5 為什麽設(shè)計(jì)多(duō)次脈衝? A5 多次脈衝可(kě)以提高穿孔效率和導入效率,從而提高(gāo)轉染率。由於NEPA21的多次脈衝(chōng)是采用(yòng)"電壓衰減"的方式進行的,不會給細胞造成(chéng)額外的損傷。這是NEPA GENE的專利技術,也是NEPA21獲得高(gāo)轉染效率和高細胞存活率的重要原因之一。L
Q6 怎(zěn)樣選擇in vivo, in ovo, ex vivo實驗用的電(diàn)極? A6 請將你需要做的實驗告訴我們,我們會為您推薦(jiàn)合適的電極和提供相關的(de)文獻(reference)、實(shí)驗方案(protocol)供您參考。讓(ràng)91成人版成為您的私人實驗顧問(wèn)!
Q7 怎樣選擇合適的電轉杯耗(hào)材? A7 一般情況,我們(men)推薦您使用2mm間隔的電轉杯,它適用的細(xì)胞(bāo)數量範(fàn)圍最廣(guǎng),也是最多研究者使用的(de)電轉杯型號(hào)。針對這個型號的電轉杯,我們可(kě)以提供的實驗方案(protocol)共享服(fú)務(wù)更多、準(zhǔn)確性更高。
Q8 NEPA21與其它品牌的電轉杯兼容嗎?或者,NEPA的電轉杯可以用(yòng)於其它(tā)品牌的電轉染儀嗎? A8 理論上(shàng)隻要大小合適,電轉杯是(shì)通用的。但不同廠(chǎng)家使用的模具和材料有差異,因(yīn)此電轉杯的電阻會有差別。當您使用其他品牌的電轉杯來執行我們為您建議的實(shí)驗方案(protocol)時,所取得的(de)效果與使用NEPA GENE電(diàn)轉杯的效(xiào)果(guǒ)可能會有差別。同理,當您將NEPA GENE的電轉杯用於其它品牌的儀器時,也需要(yào)對電轉染的參(cān)數進行優化調整。
Q9 NEPA21的轉染過程是否別的試劑輔助? A9 不需要,電轉(zhuǎn)染時隻需使用您平時培養細胞用的(de)基礎培養基(不含血(xuè)清)。目前隻有NEPA21能做到這一點。
Q10 為什麽你們不將對應於不同細胞或組織的轉染方案(protocol)在網(wǎng)頁中列出來? A10 不同的細胞類型所適用的轉染程序不一樣,即(jí)使(shǐ)是(shì)名(míng)稱(chēng)、來源相同的(de)細胞,在不同實驗室的培養環境下,細胞膜(mó)對電刺激的反(fǎn)應亦可能不一致。因此,我們(men)不建議死板的將protocol與cell type一一對應。我們(men)會根據您的細胞(bāo)的具體(tǐ)情況,為您(nín)設計一套個(gè)性化的轉染方案(protocol)。多次實踐經驗告訴我們,如果(guǒ)僅在網(wǎng)頁上給不同細胞羅列一個"標準程序(xù)",您在(zài)實際使用中很可能得不到網頁上所顯示的最佳(jiā)轉染效果(guǒ)。
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